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2020版藥典之枸杞中甜菜堿含量的檢測(cè)

更新時(shí)間:2022-03-23      點(diǎn)擊次數(shù):5030

枸杞中甜菜堿的檢測(cè)

介紹:

枸杞是茄科枸杞屬的一種,果實(shí)稱枸杞子,嫩葉稱枸杞頭。枸杞是人們對(duì)商品枸杞子、植物寧夏枸杞、中華枸杞等枸杞屬下物種的統(tǒng)稱。枸杞子具有多種保健功效,是衛(wèi)生部批準(zhǔn)的藥食兩用食物。適量食用有益健康,配合菊杞茶有清肝明目的效果。其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)在歷版中國藥典中以測(cè)定枸杞多糖和甜菜堿成分為標(biāo)準(zhǔn)。2015版中國藥典一直以薄層掃描測(cè)定甜菜堿為主,直到 2020版中國藥典才開始采用 HILIC體系的氨基柱進(jìn)行分析,用堿性氧化鋁(Alumina B)柱做前處理。本實(shí)驗(yàn)采用CLOVER Alumina B固相萃取柱(2g/12mL)對(duì)枸杞子進(jìn)行前處理,柱子無需活化縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間,并用 CLOVER NH2 5μm,4.6×250mm色譜柱進(jìn)行分析,甜菜堿保留效果好,峰形良好,干擾雜質(zhì)少,能有效保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。

枸杞中甜菜堿的檢測(cè)

2020藥典原文片段截取

image.png


適用范圍

本方法(參考中國藥典 2020版方法),適用于枸杞中甜菜堿含量的測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)步驟

1、儀器試劑耗材

渦旋混勻儀(YQ-CL200)、堿性氧化鋁固相萃取柱(貨號(hào)ALB200012)、針式過濾器(CN13M22)、NH2色譜柱、甜菜堿對(duì)照品、無水乙醇、超純水

2、對(duì)照品配制

稱取適量甜菜堿對(duì)照品,精密稱定,置于容量瓶中,用水定容至刻度線,即得濃度為 0.17mg/ml溶液。

3、樣品提取

稱取 1 g枸杞樣品(精確到 0.01 g)于 50 mL離心管中,加入 50 mL甲醇溶液,渦旋震蕩 1 min,超聲20 min, 4000 r/min離心 3 min后,取上清液待凈化。

4、樣品凈化

SPE柱:CLOVER Alumina B固相萃取柱(2g/12mL

上樣:加入 2 mL上清液,棄去;

洗脫:用 30 mL無水乙醇溶液進(jìn)行洗脫,收集洗脫液,水浴蒸至近干,用超純水溶液復(fù)溶并定容至 2 mL,后過 0.22μm MCE針式濾器至于2ml樣品瓶中 ,上機(jī)檢測(cè)。

5、液相條件

色譜柱: CLOVER  NH2, 5 μm 4.6 × 250 mm

檢測(cè)器: 195 nm

流動(dòng)相: 85/15 v/v乙腈/

流速: 1.0 mL/min

柱溫: 30 ℃

進(jìn)樣體積: 10 µL

6、色譜圖

image.png

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                                      圖 2:枸杞提取原液色譜圖

image.png


image.png

樣品加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

樣品名稱

加標(biāo)回收率%

枸杞

甜菜堿96%

7、實(shí)驗(yàn)結(jié)論                                        

由結(jié)果得出,選擇中檢維康的 CLOVER Alumina B固相萃取柱(2g/12mL),枸杞中甜菜堿的回收率大于 90%,并且可以有效去除雜質(zhì)干擾,使得樣品圖譜更加干凈,Alumina B固相萃取柱無需活化縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。選擇 CLOVER NH2色譜柱5μm,4.6×250mm,乙腈/=85:15做流動(dòng)相,甜菜堿對(duì)照品和實(shí)際樣品中甜菜堿的理論塔板數(shù)分別為 8769 10135,均超過藥典規(guī)定的 3000,符合藥典檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。

8、相關(guān)產(chǎn)品信息

貨號(hào)

描述

規(guī)格

ALB200012

CLOVER Alumina B固相萃取柱

2g/12ml,20/


甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)品

20mg


NH2色譜柱 5μm,4.6×250mm

1/

YQ-CL200

多管渦旋混勻儀/提取儀

1臺(tái)/

CN13M22

針式過濾器MCE,φ13,0.22um

100個(gè)/

CL-SB9004

2 mL 棕色短螺紋口樣品瓶,帶書寫處

100個(gè)/

CL-BC9002

2 mL 藍(lán)色聚丙烯蓋,預(yù)開口,9-425

100個(gè)/

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